CLinical and Innovation Proteomic Platform

Plateforme Protéomique Bourgogne - Franche Comté CLIPP

Bio-reconnaissance moléculaire

Sujets abordés

BIA-MS « on-a-chip »

Interactions moléculaires

Biologie moléculaire


BIA-MS « on-a-chip » hautPage Document imprimable

Objectifs

  • Optimisation des étapes de prétraitement et d’analyse des échantillons biologiques
  • Mise au point d’outils pour le diagnostic de pathologies humaines et le criblage de molécules médicamenteuses

partenaires

  • Immutep SA (Châtenay Malabry, F)
  • Promogene (Dijon, F)
  • Biacore (Suède)
  • Genoptics (Orsay, F)
  • Centrales Technologiques:
    • ARCEN (Dijon)
    • MIMENTO (Besançon)

travaux réalisés

  • Conception/réalisation de puces compatibles avec la technologie Biacore™
  • Usinage de plaques d’échantillon pour MALDI-TOF
  • Bio-Ingénieries des puces ADN et Protéines
  • Capture d’entités biologiques et Identification de complexes biomoléculaires

résultats des travaux

  • Digestion enzymatique on-chip et analyses MS MS
  • Identification protéique à l’échelle femtomole
  • MALDI-TOF « on-a-chip »MALDI-TOF « on-a-chip »

perspectives

  • Analyses de fluides biologiques moyen débit
  • Automatisation des procédés d’analyses
  • Mise au point de puces à protéines (protein arrays) pour le criblage de molécules et la recherche de biomarqueurs
  • Développement d’une plateforme microarrays « SPR-MS »:
  • microarray « SPR-MS »

Mots clés

  • BIA-MS
  • SPR
  • MALDI-TOF TOF
  • Biopuces
  • Biomarqueurs

Contacts

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Objectifs

  • Optimisation des processus de reconnaissances moléculaires
  • Ingénieries biomoléculaires
  • Fonctionnalisations chimiques et greffages de biomolécules

partenaires

  • Partenaires industriels
    • Immutep SA (Châtenay Malabry, F)
    • Promogene (Dijon, F)
    • Biacore (Suède)
    • Polypure (Norvège)
    • Genoptics (Orsay, F)
  • Centrales Technologiques:
    • ARCEN (Dijon)
    • MIMENTO (Besançon)
  • Partenaires académiques
    • Pr. Uwe Schlattner, INSERM U884: Laboratory of Fundamental and Applied Bioenergetics (LBFA) - University Joseph Fourier
    • Pr. Sylvie Ricard-Blum , Institut de Biologie et Chimie des Protéines UMR 5086 CNRS - Université Lyon 1
    • Pr. Pierre Pothier, Laboratoire de Virologie - Centre National de Référence des virus entériques Pôle de Biologie, CHU de Dijon
    • Dr. Laurence Nicod, IFR-133 Besançon , EA4267 Sciences séparatives, biologiques et pharmaceutiques (2sbp)

Travaux réalisés

  • Conception/réalisation de puces compatibles avec la technologie Biacore™
  • Fonctionnalisations 2D (SAMs) hautement contrôlées
  • Développements de biopuces lipidiques, ADN, protéines, virus et cellules
  • Etudes des constantes cinétiques d’intéraction et captures d’entités biologiques
  • Biopuces Home-made biopuce Home-made.png

  • Modèles membranaires Puces à protéines Puces à cellule
    Modèle de Biopuces Modele membranaire Puces à proteines Puces à cellule

  • Protein Arrays Protéines microarray.png

  • Matrice acoustique actionneur à goute

résultats des travaux

  • Réduction des adsorptions non spécifiques
  • Contrôle de la densité surfacique en ligand
  • Biopuces hautement spécifiques
  • Analyses de fluides biologiques complexes

perspectives

  • Mise au point de « protein arrays » pour le criblage de molécules et la recherche de biomarqueurs
  • Automatisation des procédés d’analyses
  • Développement de l’analyse SPR multiplexée
  • Etude multiparamètre de cellules immobilisées
  • Environnement de salle blanche (classe 10 000)

Mots clés

  • AFM
  • SPR
  • Immunocapteurs
  • Biopuces
  • Biomarqueurs
  • Microarrays

Contacts

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Objectifs

  • Utilisation d’outils pour la séparation, le fractionnement et la caractérisation des protéines
  • Bioingenieries sur les molécules et macromolécules biologiques
  • Développement d’ innovations technologiques pour la mise en évidence d’interactions macromoléculaires (protéine-protéine, protéine-ADN, membranes lipidiques-protéine)

partenaires

  • IFR 100, IFR 133, ICB, FEMTO-ST
  • Diaclone (Besançon, F)
  • EFS (Besançon, F)
  • CGM (Gif/Yvette)

travaux réalisés

  • En biochimie / biologie moléculaire

  • Etiquetage des protéines (6 His, GST, GFP)
  • Purification des protéines étiquetées (Chromatographies d'affinité)
  • En protéomique

  • Séparation des protéines par la technologie chromatographie liquide bidimentionnelle (PF2D)
  • Séparation des protéines par électrophorèse monodimentionnelle et bidimensionnelle
  • Colorations des gels (Bleu de Coomassie, Bleu colloïdal, Nitrate d'argent)
  • Western blot

résultats des travaux

  • Développement d’une interface biospécifique originale pour la mise en évidence de l’interaction GEC1-tubuline par résonance plasmon de surface
  • Séparation des protéines Séparation protéines

perspectives

  • Caractérisation des interactions macro-moléculaires
  • Identification de partenaires moléculaires de protéines qui interfèrent avec la progression des cancers

Mots clés

  • Protéines recombinantes
  • Cibles moléculaires
  • Complexes protéiques

Contacts

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